דנ"א

מוסד לימוד
מקצוע
מילות מפתח , ,
שנת הגשה 2008
מספר מילים 2445
מספר מקורות 4

תקציר העבודה

תקציר- במסגרת המעבדה לביוכימיה נבדקו אתרי חיתוך של אנזימי רסטריקציה (BamHI, Bglll,HinDlll). אנזימי רסטריקציה אותם בודקים חותכים את ה-DNA ברצפים ספציפיים ובכך מאפשרים בידוד של מקטעי DNA קטנים.                                                                                 DNA הוא החומר הגנטי של כמעט כל אורגניזם חי הקובע את התורשה, הנמצא ברובו בגרעין התא.
דנ"א היא חומצת גרעין המורכבת משני גדילים העשויים מיחידות שנקראות נוקלאוטידים.
שני הגדילים משולבים אחד בשני ויוצרים סליל כפול, ומחוברים אחד לשני באמצעות קשרי מימן בין בסיסי הנוקלאוטידים. המידע הגנטי ב-דנ"א נמצא ברצף של הבסיסים.                                                                                                                              אנזימים הם קבוצה ייחודית של חלבונים שמגבירים את הקצב של תגובות כימיות שונות המתרחשות בתאים חיים, ועל כן הם נקראים זרזים ביולוגיים. אנזימים מעורבים בכל תהליכי חילוף החומרים.                                                                                                                        אנזימי רסטריקציה הם אנזימים בקטריאליים המזהים רצפים של ארבעה עד שמונה בסיסים. רצפים אלו נקראים אתרי רסטריקציה.                                                                                              בניסוי אנו הרצנו דנ"א בג'ל אלקטרופורזה. ג'ל אלקטרופורזה היא שיטה השימושית למיפוי אתרי הרסטריקציה של מקטע דנ"א בשל יכולתה לאפשר הערכה של גודל מולקולות הדנ"א. נלקח DNA פלסמידי, נעשה חיתוך באנזימי רסטריקציה הנ"ל. בנוסף הוכן ג'ל אגרוז להרצת דוגמאות שהתקבלו אחרי חיתוך. דוגמאות הורצו בג'ל לקבלת מפת אנזימי הרסטריקציה. אחרי הרצה נעשתה בדיקה בעזרת מנורה UV וצילום של הרצה. לפי הצילום נבנה מפת רסטריקציה של פלסמיד ואנזימים הנ"ל. השיטה מבוססת אך ורק על תצלום שהתקבל ממצלמת UV, התצלום קטן, אינו ציבעוני, מטושטש כתוצאה מכך יתכן וקימות סטיות מהערכים האמיתיים. הוסק מהניסוי כי האנזים BgIII אינו פעל כלל.   HinDIIIחתך בשני מקטעים ו- BamHIחתך פעם אחד.
מהסיבה כי החיתוכים תואמים לספרות ניתן לומר כי השיטה היא מדויקת אבל היא מסובכת לזיהוי המקטעים במדוייק.
תוכן עינינים-
2 .
מבוא 4-8
3 . תיאור ציוד וחומרים -.9-11
4 . תיאור ביצוע הניסוי -.12-13
5.
תוצאות -…14-15
6 . דיון וניתוח תוצאות –.16
7.
מסקנות –..16
8 .
המלצות –..17
9. מקורות ספרות .17